Клинические исследования Коллагена питьевого ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА

Клинические исследования и студии

• Увеличение влаги в раговом слое кожи после употребления гидролизата коллагена в течение 4 недель (Improvement in the Moisture Content of the Stratum Corneum Following 4 Weeks of Collagen Hydrolysate Ingrestion). Nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi, 56, 137-145 (2009)​

---

• Синергетичное воздействие пептида коллагена и пептида эластина, получаемых из ласосей, на образование гиалурованой кислоты и рост находящихся в дерме человека фибробластов (SF-TY)  (Synergistic effect of collagen peptide and elastin peptide derived from salmon on promoting hyaluronic acid production and cell growth of normal human dermal fibroblast cells) (SF-TY). Nippon Suisan Gakkaishi, 75, 86-88 (2009)

 

Испытание функциональных возможностей «КОЛЛАГЕН питьевой ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» (БИОБАНК, Япония)

Данные результатов испытаний на «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» (БИОБАНК) перечислены в следующем порядке.

◎     Испытание на клетках

•      Касательно активирующего воздействия коллагена на фибробласт

→    Активирующее воздействие  было отмечено в методе, основанном на зависимости от концентрации.

◎     Испытание на поглощение

•     Сравнительные испытания на поглощающую способность коллагенов из разных исходных материалов.

→   Рыбий коллаген (БИОБАНК) показал самую высокую поглощающую способность (при анализе количества гидроксипролина в пробе).

•     Сравнительное испытание на поглощающую способность коллагенов разной молекулярной массы.

→   Низкомолекулярный коллаген поглощается быстрее и, как полагают, имеет более высокую эффективность применения в организме.

Рыбий коллаген компании БИОБАНК: Пептид коллагена (содержит трипептиды коллагена).

Происхождение коллагена – красный луциан. Это рыба, проживающая в натуральной среде.

 

Активирующее воздействие коллагена на фибробласты (испытание на клетках)

1.    Цель

Анализ активирующего воздействия рыбьего коллагена (БИОБАНК) на фибробласты.

Испытуемый образец

«КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» (БИОБАНК, Япония).

2.    Метод

1. 100 мкл клеток были распределены в количестве 1 x 104 на ячейку и культивированы при 37°C в течение одного дня.
2. Затем были добавлены 50 мкл питательной среды 106S с добавлением 4% LSGS (Low Serum Growth Supplement – ростовая добавка с низким содержанием сыворотки) и были добавлены соответствующим образом 50 мкл каждой из проб с разной концентрацией и культивированы в течение двух дней.
3. После того, как были добавлены 25 мкл MTT реагента, клетки были инкубированы при 37°C в течение одного часа.
4. Супернатант был удален и было добавлено 100 мкл лизата формазана для лизирования клеток.
5. Поглощение при 590 нм было измерено для оценки способности активации клеток.

3.    Результаты

«КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» (БИОБАНК, Япония) промотировал активацию фибробластов в методе, основанном на зависимости от концентрации.

Рис. Активирующее воздействие на фибробласт коллагена «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» (БИОБАНК, Япония)

 

Abs (590 nm)	Поглощение (при 590 нм)
Сontrol	Контроль
µg/ml	мкг/мл

 

4.    Заключение

«КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» (БИОБАНК, Япония) продемонстрировал активирующее действие на фибробласт в методе, основанном на зависимости от концентрации. Поэтому, как ожидается, будет иметь положительные результаты в стремлении к достижению красивой кожи.

Сравнительное испытание поглощения коллагена из различных источников (Испытание на поглощение)

1.    Цель

Анализ поглощения коллагена «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» (БИОБАНК, Япония), коллагена из рыбьей чешуи и свиного коллагена с использованием крыс.

2.    Метод

Крысам-самцам линии Спраг-Доули (SD – Sprague-Dawley) в возрасте 7 недель предоставили возможность акклиматизироваться в течение одной недели до начала исследования. Они были разделены на три группы по пять крыс: 1. Группа «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» (БИОБАНК, Япония), 2. Группа коллагена из рыбьей чешуи (другая компания A), и 3. Группа свиного коллагена (другая компания B).

После начала голодания в течение 18 часов со дня до начала испытания крысы получили однократную дозу 500 мг/кг каждой пробы. Кровь была забрана до введения проб, по истечении 15 минут, 30 минут, 60 минут, 120 минут и 240 минут, и была получена плазма крови. Собранная плазма крови была гидролизована соляной кислотой, и было измерено содержание гидроксипролина (Hyp) с применением ВЭЖХ.

<Схема испытания>

<Условия ВЭЖХ>

Колонка: Cosmosil MS- II (4,6×250 мм)

Детектируемая длина волны: 254 нм

Температура: 40°C

Подвижная фаза: A: 150 мM ацетат аммония

(pH 6,0) — 5% ацетонитрил

B: 60 % ацетонитрил

3.    Результаты

3-1) Хронологическое изменение содержания Hyp в плазме крови.

После введения каждой пробы коллагена, содержание Hyp было немного выше в пробах с «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» до 30 мин. спустя, а свиной коллаген продемонстрировал показатель немного выше после 120 мин. Однако в целом не было значительного различия среди всех проб (Рис. 1).

3-2) Изменение содержания Hyp в плазме крови посредством введенного содержания Hyp.

Введенные пробы содержали неравное количество Hyp. Поэтому содержание Hyp в плазме крови было рассчитано, принимая во внимание содержание Hyp в каждой пробе, введенной крысам. В результате содержание Hyp в плазме крови было выше в следующем порядке: «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА», коллаген из рыбьей чешуи и свиной коллаген (Рис. 2).

Площадь под кривой (AUC) выведена в Таблице 1. При расчете на пробу, содержащую Hyp, предполагается, что поглощающая способность «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» была выше на 8 %, чем поглощающая способность коллагена из рыбьей чешуи.

Рис.1 Изменение Нур в плазме крови

Рис.2 Изменение Нур в плазме крови посредством введенного Нур

Hyp в плазме крови (мг/дл)

Hyp в крови (мг/дл)/Введенный Hyp (мг/кг)

Время (мин.)

«КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» (БИОБАНК)

Коллаген из рыбьей чешуи

Свиной коллаген

 

Таблица 1. Площадь под кривой(AUC) содержания Hyp в плазме крови посредством введенного содержания Hyp

4.    Заключение

Не было значительного различия в поглощающей способности в каждой пробе коллагена. При принятии во внимание содержания гидроксипролина в каждой пробе «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» показал более высокую поглощающую способность, чем поглощающая способность коллагена из рыбьей чешуи или свиного коллагена.

 

Сравнительное исследование поглощения коллагена с разной молекулярной массой

1.    Цель

Исследование различия в поглощении при разной молекулярной массе коллагена.

2.    Методы

Крыс-самцов линии Спраг-Доули в возрасте 11 недель кормили в течение одной недели в качестве подготовки и разделили на две группы по 5 крыс каждая следующим образом:

1. Низкомолекулярный коллаген («КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА»).

2. Высокомолекулярный коллаген (другая компания).

После голодания в течение 18 часов от дня перед началом испытания крысам была введена однократная доза 500 мг/кг каждой пробы. Кровь была забрана до введения, после 30 минут, 60 минут, 120 минут и 240 минут и была получена плазма крови. Собранная плазма крови была гидролизована соляной кислотой, и было измерено содержание гидроксипролина (Hyp) с применением ВЭЖХ.

<Схема испытания>

Колонка: Cosmosil AR-II (4,6 x 250 мм)<Условия ВЭЖХ>

Детектируемая длина волны: 254 нм

Температура колонки: 40 °C

Подвижная фаза: A: 150 мM ацетат аммония

(pH6,0) — 5% ацетонитрил

B: 60% ацетонитрил

Градиентное условие:
Время (мин.)	0-2	2-15	15-20	20-30	30-45
Раствор B (%)	0	0-35,5	35,5-100	100	0

 

3.    Результаты

Время, при котором количество Hyp в плазме крови достигало своей максимальной величины, было:

«КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» (БИОБАНК, средняя молекулярная масса 1 000), 60 минут после ведения. Высокомолекулярный коллаген (другая компания, средняя молекулярная масса 10 000), 120 минут после введения. Оно показало, что коллаген с большей молекулярной массой имеет более позднее поглощение. (Рис. 1)

Кроме того, мы сравнили оба коллагена с Hyp в плазме крови относительно введенного количества Hyp, принимая в расчет количество Hyp, содержащееся вo введении коллагена. Количество Hyp в плазме крови в случае низкомолекулярного коллагена было выше, чем в случае высокомолекулярного коллагена на всем протяжении испытания. (Рис. 2)

Рис.1 Изменение Нур в плазме крови

Рис.2 Повышение Нур (мкг/дл) в плазме крови посредством введенного Нур (мг/кг)

Hyp в плазме крови (мкг/дл)

Hyp в крови (мг/дл)/введенный Hyp (мг/кг)

Время (мин.)

Низкомолекулярный коллаген «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА»

Высокомолекулярный коллаген

<Площадь под кривой>

Расчет площади под кривой (AUC) из Рис. 1 и Рис. 2 показал, что низкомолекулярный коллаген «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» имеет более высокое поглощение, чем высокомолекулярный коллаген, и не было никакого влияния со стороны Hyp в крови. (Таблица 1)

Taблица 1. Площадь под кривой (AUC) (среднее значение ±S.E.)

	Низкомолекулярный коллаген КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА	Высокомолекулярный коллаген (другая компания)
Без корректировки количества Hyp в пробе (Рис.1)	498 ± 89	488 ± 88
С корректировкой количества Hyp в пробе (Рис.2)	12,0 ± 2,2	8,1 ± 0,7

 

4.    Заключение

Результат показал, что низкомолекулярный коллаген  «КОЛЛАГЕН ОМ-Х® плюс от Dr. OHHIRА» имел более быстрое поглощение и большую площадь под кривой по сравнению с высокомолекулярным коллагеном. Это заставило нас думать, что низкомолекулярный коллаген имел более высокую эффективность относительно степени бионакопления.